為什么有的物質(zhì)激發(fā)后能發(fā)出熒光，有的不能？

　　不同熒光蛋白在激發(fā)光源的激發(fā)下發(fā)出不用的光，便于生物基因的表達(dá)與調(diào)控、蛋白質(zhì)的定位、轉(zhuǎn)移、信號傳遞、細(xì)胞分離和純化的觀察與研究。

　　熒光蛋白(GFP)在激發(fā)光源的激發(fā)下能發(fā)出熒光，可用于生物工程研究，生活中的熒光棒在吸收足夠的光源可在黑暗中發(fā)出熒光，然而還是有很多物質(zhì)不能發(fā)出熒光，為什么呢？

　　我們先來看看分子吸收光譜與產(chǎn)生熒光的機(jī)制：

　　當(dāng)物質(zhì)分子吸收某些特征頻率的光子以后，可由基態(tài)躍遷至第一或第二電子激發(fā)態(tài)中各個不同振動能級和各個不同轉(zhuǎn)動能級。處于激發(fā)態(tài)的分子通過無輻射弛豫（例如，與其它分子碰撞過程中消耗能量，或者對分子組織而言，誘發(fā)光化反應(yīng)而消耗能量等）降落至第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動能級，然后再由這個最低振動能級以輻射弛豫形式躍遷到基態(tài)中各個不同的振動能級，發(fā)出分子熒光，然后再無輻射弛豫至基態(tài)中最低振動能級。

　　幾乎所有物質(zhì)分子都有吸收光譜，但不是所有的物質(zhì)都會發(fā)出熒光，因?yàn)楫a(chǎn)生熒光必須具備以下條件：

　　吸收了與本身特征頻率相同的能量之后的物質(zhì)分子，必須具有很高的熒光效率。很多吸光物質(zhì)并不產(chǎn)生熒光，主要是因?yàn)樗鼈儗⑺漳芰肯挠谂c溶劑分子或其他分子之間的相互碰撞中，還可能消耗于一次光化學(xué)反應(yīng)中，因而無法發(fā)射熒光，即熒光效率很低。

　　該物質(zhì)分析必須具有與所照射的光線相同的頻率，這與分子的結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。