熒光顯微鏡中的熒光鏡檢術以及使用熒光鏡檢術的注意事項
點擊次數(shù):914 更新時間:2021-06-25
熒光顯微鏡中的熒光鏡檢術以及使用熒光鏡檢術的注意事項
熒光鏡檢術是用短波長的光線照耀用熒光素染色過的被檢物體,使之受激起后而產(chǎn)生長波長的熒光,然后調(diào)查。熒光鏡檢術廣泛使用于生物,醫(yī)學等范疇。
1.熒光鏡檢術一般分為透射和落射式兩種類型。
?。?)透射式:激起光來自被檢物體的下方,聚光鏡為暗視界聚光鏡,使激起光不進入物鏡,而使熒光進入物鏡。它在低倍情況下亮堂,而高倍則暗,在油浸物鏡下較難操作,尤以低倍的照明規(guī)模難于確認,但能得到很暗的視界背景。透射式不適用于非透明的被檢物體。
?。?)落射式:透射式目前簡直被淘汰,新型的熒光顯微鏡多為落射式,光源來自被檢物體的上方,在光路中具有分光鏡,所以對透明和不透明的被檢物體都適用。因為物鏡起了聚光鏡的效果,不只便于操作,并且從低倍到高倍,可以實現(xiàn)整個視場的均勻照明。
2.熒光鏡檢術的注意事項
(1)激起光長期的照耀,會產(chǎn)生熒光的衰減和淬滅現(xiàn)像,因此盡可能縮短調(diào)查時間,暫時不調(diào)查時,使用擋板隱瞞激起光。
?。?)作油鏡調(diào)查時,使用“無熒光油”。
?。?)熒光簡直都較弱,應在較暗的室內(nèi)進行。
?。?)電源最好裝穩(wěn)壓器,不然電壓不穩(wěn)不只會降低汞燈的壽命,也會影響鏡檢的效果。
目前許多新式生物研討范疇使用到熒光顯微鏡,如基因原位雜交(FISH)等等。